■ 技术路线

　　方兴未艾的CRISPR/Cas9系统是继锌指核酸酶(ZFNs)和TALEN核酸酶之后的另一个可精确定点编辑基因组DNA的新技术，具有设计构建简单快速等优点。已在人类细胞系、斑马鱼、小鼠、果蝇和酵母等多个物种中利用。国内外研究人员纷纷利用CRISPR-Cas系统定点突变了水稻、小麦、拟南芥等多种作物的特定基因，都证实CRISPR-Cas系统能够用于植物的基因组编辑。

　　常用的CRISPR/Cas9由20个碱基的guide RNA 通过碱基配对来识别DNA靶位点序列，从而介导靶基因的编辑，包括敲入和敲除突变。

　　我们以常用农杆菌介导的植物转化系统为骨架，构建了含一个表达Cas9的二元穿梭载体和一个表达sgRNA的中间载体的CRISPR/Cas9载体,成功敲除了水稻和烟草中的目标基因,并且接受委托成功完成番茄和康乃馨的CRIPSR/Cas9载体转化，获得突变植株。

　　我们面向科研机构提供从载体构建到植物转化及突变检测的整套技术合作，尤其能够根据具体的植物品种和靶基因序列设计优化方案，提高突变效率。

■ 实验选项